
A+C群脑膜炎球菌多糖IgG抗体检测试剂盒(酶联免疫法)
产品标准编号:YZB/国 8183-2014
产品说明:康珠生物生产的A+C流脑抗体检测试剂盒用于定性检测血清或血浆样本中的A+C群脑膜炎球菌多糖IgG抗体((A+C)MP-lgG)。
【产品名称】
通用名称:康珠生物A+C群脑膜炎球菌多糖IgG抗体检测试剂盒(酶联免疫法)
【包装规格】
96人份/盒、48人份/盒。
【预期用途】
本产品用于定性检测血清或血浆样本中的A+C群脑膜炎球菌多糖IgG抗体((A+C)MP-IgG)。
流行性脑脊髓膜炎简称流脑,是脑膜炎奈瑟菌感染引起的化脓性脑膜炎,易感染人群以5岁以下儿童为主,且年龄越小发病率越高。临床表现为突然发热、头痛、呕吐、皮肤粘膜斑点及颈项强直等脑膜刺激症,病程进程快。我国流行主要以A群Nm为主,近年来C群也逐渐增多,所以采用A、A+C流脑疫苗进行预防接种,其使抗体产生A+C群脑膜炎球菌多糖IgG抗体,有效的防止该传染病的暴发和流行,发病率也显著降低。
【检验原理】
本试剂盒采用酶联免疫间接法原理,用经灭活纯化的A+C群脑膜炎球菌多糖抗原包被酶标板制备固相抗原,样本中A+C群脑膜炎球菌多糖IgG抗体与包被抗原反应,再与辣根过氧化物酶标记的鼠抗人IgG结合, 形成抗原-抗体-酶标抗体复合物,加入底物TMB后产生显色反应,加入终止液后经酶免分析仪测定OD值,再与临界值比较以判定样本中是否含有A+C群脑膜炎球菌多糖IgG抗体。
【主要组成成分】
本试剂盒由反应板、酶结合物、阳性对照、阴性对照、浓缩洗涤液、显色液A、显色液B、终止液、样品稀释液、自封袋和封片组成:
序号 |
组份名称 |
主要组成成分 |
装量 |
|
96人份/盒 |
48人份/盒 |
|||
1 |
反应板 |
包被有A+C群脑膜炎球菌多糖抗原 |
1块(96孔) |
1块(48孔) |
2 |
酶结合物 |
含HRP-鼠抗人IgG |
1瓶(6.0ml) |
1瓶(3.0ml) |
3 |
阳性对照 |
含A+C群脑膜炎球菌多糖IgG抗体阳性血清 |
1瓶(0.5ml) |
1瓶(0.3ml) |
4 |
阴性对照 |
含A+C群脑膜炎球菌多糖IgG抗体阴性血清 |
1瓶(0.5ml) |
1瓶(0.3ml) |
5 |
浓缩洗涤液 |
含磷酸盐 |
1瓶(40.0ml) |
1瓶(20.0ml) |
6 |
显色液A |
含过氧化脲 |
1瓶(6.0ml) |
1瓶(3.0ml) |
7 |
显色液B |
含TMB |
1瓶(6.0ml) |
1瓶(3.0ml) |
8 |
终止液 |
含硫酸 |
1瓶(6.0ml) |
1瓶(3.0ml) |
9 |
样品稀释液 |
含小牛血清 |
1瓶(12ml) |
1瓶(6ml) |
10 |
自封袋 |
—— |
1个 |
1个 |
11 |
封片 |
—— |
3片 |
3片 |
【储存条件及有效期】
2~8℃保存,有效期为12个月。
禁止冷冻或在过有效期后使用,生产日期、有效期至:见包装标签。
【适用仪器】
酶免分析仪(检测波长450nm,参考波长630nm)、洗板机、37℃恒温水浴箱、移液器、振荡器。
【样本要求】
1. 血清样本按常规方法由静脉采集。血浆样本可采用常规用量的抗凝剂(EDTA-2Na: 12g/L、肝素:15000IU/L、枸椽酸钠:3.2g/L、草酸钠:
0.01mol/L(1.34g/L))抗凝。
2.样本应新鲜,避免反复冻溶及溶血。样本可在2-8℃保存一周,长期保存应于-20℃条件下储存。
【检验方法】
1.加样: 加血清或血浆样本时,每孔先加入样本稀释液100微升,再加入待测样本10微升,轻轻振匀。
每次试验设阴性对照、阳性对照各2孔,每孔加入相应对照血清100微升,并设空白对照1孔(暂
不加任何液体)。
2.温育:用封片封板后,37℃温育45分钟。
3.洗板:将浓缩洗涤液用纯化水或双蒸水稀释20倍,设定洗板5次程序,每次浸泡时间为(30~60)秒,洗板结束后在吸水纸上拍干。
4.加酶:除空白对照孔外,每孔加入酶结合物50微升。
5.温育:用封片封板后,37℃温育30分钟。
6.洗板:同步骤3。
7.显色:每孔加入显色液A、显色液B各50微升,用封片封板后,轻轻振匀,37℃避光显色15分钟。
8.终止:每孔加终止液50微升,轻轻振匀。
9.测OD值:对空白对照调零,在酶标仪450nm处测定OD值,或在双波长450nm/630nm处测定OD值。
10.结果分析:当使用单波长(450nm)测定时应扣除空白值,当使用双波长测定不应扣除空白值。
【阳性判断值】
临界值 cutoff
value=0.10+阴性对照平均值(不到0.05按0.05算,超过0.05按实际值平均值计算。)
【检验结果的解释】
样本OD值<临界值时,为阴性结果:表示待测样本中未检出A+C群脑膜炎球菌多糖IgG抗体;
样本OD值≥临界值时,为阳性结果:表示待测样本标本中检出A+C群脑膜炎球菌多糖IgG抗体,说明既往感染或已经过A+C 群脑膜炎球菌多糖疫苗的计划免疫。
【检验方法的局限性】
1.高灵敏度的免疫实验方法,存在潜在的非特异性反应。
2.检测高度溶血的样本和有微生物污染的样本时可能会有错误的结果。
3.本检测结果仅供临床参考,如需确诊病例请结合临床症状及其他检测手段,不得作为临床诊断的唯一标准。