麻疹病毒IgG抗体检测试剂盒（酶联免疫法）

【产品名称】

通用名称：麻疹病毒IgG抗体检测试剂盒（酶联免疫法）

【包装规格】

96人份/盒

【预期用途】

本产品用于体外定性检测人血清、血浆或全血样本中的麻疹病毒IgG抗体滴度是否达到200 mIU/ml。

适用于麻疹病毒感染的辅助诊断、体外检测人体内抗麻疹病毒IgG抗体滴度是否达到200mIU/ml。

麻疹病毒是一种球形、非节段的、单股负链RNA病毒，直径为120～125nm，在病毒学上属副粘病毒科麻疹病毒属。麻疹病毒主要通过呼吸道飞沫实现人与人的传播，此外还可以气溶胶的形式通过空气传播。病毒在前驱期的传染性最强，在易感家庭（和机构）人群中的二代发病率较高，可达到90%甚至以上。由于病例在出诊前、后均可排毒，平均在家庭内首发病例出诊后的14～15天，继发病例即可出现皮疹。几乎所有原发病例（除体内仍有母传抗体或注射了免疫球蛋白的病例外）均呈显性感染。目前尚无证据表明免疫人群暴露后可不出现症状但传播病毒。

临床表现为呼吸道暴露后，经过10～12天的潜伏期，前期的临床症状开始出现。如果皮肤或黏膜破损后发生暴露，潜伏期可缩短至2～4天；免疫功能抑制的患者潜伏期可能会延长。前驱期主要表现为发热、全身乏力、结膜炎、鼻炎和支气管炎（如咳嗽），可持续2～4天，这些症状与一般的上呼吸道感染类似。随后4天内，体温明显上升，可达到40.6℃。柯氏斑被认为是麻疹特有的一种黏膜疹，出现于皮疹前1～2天的颊粘膜处，也可持续至疹后1～2天。病毒暴露14天后，病例出现红斑丘疹，从头部（脸、前额、发线、耳后和上颈部）经躯干至四肢，约需3～4天。皮疹通常集中于面部和躯体上半部，压之褪色。随后3～4天，皮疹按照出诊顺序开始消退，并遗留浅褐色色素沉着。

在自然感染麻疹病毒后，人体可出现长期（可能是终生）的免疫记忆，其中包括不断产生麻疹病毒特异性抗体和循环系统中的麻疹病毒特异性CD4+和CD8+ T淋巴细胞。麻疹疫苗可诱导与自然感染相当的体液免疫和细胞免疫，不过抗体滴度通常较低。 此外，与自然感染过麻疹的产妇相比，接种麻疹疫苗的产妇所生婴儿体内的母传抗体平均浓度也较低。接种麻疹疫苗后， 血液中可出现一过性的、麻疹特异性免疫球蛋白IgM 抗体，而粘膜分泌液中则出现 IgA 抗体；IgG抗体可在血液中持续存在多年，同时，世界卫生组织（WHO）在“免疫接种系列之免疫学基础（第七部分：麻疹）”中表示，使用NIBSC第二代国际标准品（NIBSC code：66/202）进行溯源，人体内抗麻疹病毒IgG抗体最低保护水平为200mIU/ml。

目前检测麻疹病毒特异性的IgG抗体的主要方法有：血凝抑制试验（HI）、补体结合试验（CF）、蚀斑减少中和试验（PRNT）、微量细胞病变抑制试验、酶联免疫吸附试验（ELISA）等。

【检验原理】

试剂盒采用酶联免疫间接法原理。

本试剂盒系用灭活纯化麻疹病毒抗原包被微孔板。样品加入微孔后，其中抗麻疹病毒抗体与微孔中固相化麻疹病毒抗原形成抗原-抗体免疫复合物，洗涤去除未结合物，加入辣根过氧化酶标记小鼠抗人IgG单克隆抗体，与复合物反应形成抗原-抗体-酶标二抗复合物，洗涤去除未参与反应的酶结合物，加TMB底物显色，呈色的深浅与麻疹病毒IgG抗体的含量成正比。

【主要组成成分】

【储存条件及有效期】

1. 于2~8℃冷藏、避光保存，禁止冷冻，有效期为12个月。

2. 未用完的预包被板应立即与干燥剂一起放入自封袋中密封，2~8℃环境中保存时间不得超过一周。

3. 未用完的其他组分试剂应立即将瓶盖盖好，置于2~8℃环境中保存，保存时间不得超过一周。

4. 产品的生产日期及有效期至详见产品标签。

【适用仪器】

含450nm波长的酶标仪或全自动酶免分析仪。

【样本要求】

1. 人血清/血浆或全血均可用作测定样本。抗凝剂（肝素、EDTA、柠檬酸钠）对样本检测结果无干扰。

2. 血清/血浆样品2～8℃冷藏保存可稳定4天，但建议在72小时内使用；全血样本即采即用；若需长期保存，血清/血浆样品可直接-20℃冷冻保存可稳定一年，全血样本可用样品稀释液稀释后吸出上清液，-20℃冷冻保存可稳定一年。冻存的样本冻融次数建议不超过3次。

3. 应避免使用溶血、脂血样本，不能使用被污染的样本。

【检验方法】

1. 样品准备

1.1 先向1.5ml离心管中加入样品稀释液500μl。编号。

1.2 采集全血10μl，或吸取血清/血浆5μl，加入相应的离心管中，立即轻摇、混匀。

1.3 若为全血样品，将离心管置室温（或4℃冰箱）静置，待红血球全部沉降到孔底，取上清液检测；若为血清或血浆样品，混匀后即可使用。

2. 将试剂盒和样品从冷藏环境中取出，放置30分钟，平衡至室温；恒温箱或水浴锅调节至37±1℃。

3. 配制洗涤液：1倍体积的浓缩洗涤液加入19倍体积的蒸馏水、纯化水或去离子水，混匀。

4. 加样：每次试验设阳性对照1孔、阴性对照1孔，每孔加入相应的对照液100μl；设空白对照1孔，加样品稀释液100μl；其余每孔加入已稀释的样品（全血样品取上清液）100μl。贴上封口膜，置37℃温育60分钟后，小心将封口膜揭掉，倒掉孔中的液体。每孔加300μl已稀释好的洗涤液，轻微振摇10秒后倒掉，拍干。重复5次。有条件的可按上述洗涤条件设置参数，用洗板机洗涤。

5. 加抗人IgG抗体酶标记物：每孔100μl（空白孔不加）。贴上封口膜，置37℃温育30分钟后，小心将封口膜揭掉，倒掉孔中的液体。每孔加300μl已稀释好的洗涤液，轻微振摇10秒后倒掉，拍干。重复5次。

6. 显色：每孔加底物液A及底物液B各50μl，混匀。贴上封口膜，置37℃避光显色15分钟。

7. 测定：小心将封口膜揭掉，每孔加终止液50μl，混匀。30分钟内用酶标仪双波长450nm/630nm测定各孔OD值(使用单波长450nm时，必须以空白孔调零）。

【阳性判断值】

1. 阴性对照OD₄₅₀＜0.3，阳性对照OD₄₅₀≥0.6，试验成立。

2. Cut-Off 值 = 阴性对照OD₄₅₀值 × 2.1，S/CO值 =

0.9≤S/CO值＜1.1，判为可疑，建议重复检测；

S/CO值≥1.1，判为阳性；

S/CO值＜0.9，判为阴性。

【检验结果的解释】

1. 阳性结果：S/CO值≥1.1，表示样本中麻疹病毒IgG抗体滴度不低于200mIU/ml。

2. 阴性结果：S/CO值＜0.9，表示样本中麻疹病毒IgG抗体滴度低于200mIU/ml。

3. 可疑结果：0.9≤S/CO值＜1.1，表示样本中麻疹病毒IgG抗体为处于临界值，建议重复检测或两周后再次检测，动态观察抗体水平的变化。

【检验方法的局限性】

仅用于麻疹病毒感染的辅助诊断及麻疹病毒IgG抗体的定性检测。